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法证部高级化验师高彦博(欧阳震华饰)博学、冷静，他深信法证力量能贯彻“毋枉毋纵”的精神。多年来，他带领法证部与警方合作侦破无数案件。在《法证先锋II》中，观众能透过大屏幕认识到更新、更科学化的专业法证技术，跟随各法证主角抽丝剥茧的破案进程，在紧凑悬疑的气氛中一窥神秘精妙的法证学门坎。
　　泽琛和汀汀有情人终成眷属，正当他们修成正果准备步入教堂之际，天外飞来横祸，汀汀被卷入炸弹袭击当场炸死，小柔重伤，右耳失聪，右手重创！万分无奈下，小柔退下前线，因着重重打击，她逐渐失去对将来的信心；接替小柔的高级督察马帼英，虽精明能干，却不近人情，团队间合作出现问题，而且她似乎有着不可告人的过去？另一边厢，泽琛痛失至爱，伤痛欲绝，却意外重遇年少混黑社会时的好兄弟逸升。二人现已重踏正途，各自有一番事业，且同样恋上了外冷内热的帼英，正当二人为情所伤之际，昔日的年少轻狂却为他们带来了麻烦──维护正义的法证人员，竟是凶杀案的嫌疑犯？
　　几位法医、法证、警界最顶尖的精英，虽然彼此间的性格、行事、际遇各有不同，但最后均众志一心，为了捍卫属于自己的正义而牺牲所有。这班为我们侦破了众多疑难奇案的英雄，又会怎样解决他们自己的麻烦？泽琛和逸升的命运，终如何收场？处于他们二人之间的帼英，又情归何处？